ELISA檢測試劑盒通常，酶聯(lián)免疫反應(yīng)曲線是規(guī)則的，如果曲線不規(guī)則說明實驗穩(wěn)定性差，宜做平行樣修正。做三平行樣取中間值，也可做雙平行樣，取算術(shù)平均值，但做雙平行樣時兩個樣本檢測值相差>20%時宜將該數(shù)值全部刪除。在ELISA檢測試劑盒中通常有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶聯(lián)系物，加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留意不行濺起，不行產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本通常用微量加樣器，按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，避免發(fā)作交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。
ELISA檢測試劑盒在處理和保存方面要考慮以下幾個方面：
(1)要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有類似過氧化物的活性，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA檢測試劑盒測定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。
(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染，一則細(xì)菌的生長，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
(3)血清標(biāo)本如是以無菌操作分離，則可以在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長時間保存，應(yīng)在-70℃以下。
(4)冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果。此外，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意，不要進(jìn)行劇烈振蕩，反復(fù)顛倒混勻即可。
(5)標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
